Immunoferment analiz - Медицина - Презентации

Информация о документе

Цена	3000UZS
Размер	17.6KB
Покупки	0
Дата загрузки	18 Декабрь 2024
Расширение	docx
Раздел	Презентации
Предмет	Медицина

Immunoferment analiz

Купить

Immunoferment analiz (ELISA TEST) IFA (Immmunoferment tahlil) Reja: 1. IFA ning qo’llanilish sohalari. 2. IFA ning mohiyati. 3. IFA reaksiyasini qo’yish texnikasi

1. Immunoferment analiz – antigen-antitelo o’rtasidagi reaksiyalarning maxsusligi va yuqori tanlanishiga asoslangan laboratoriya tekshirishlaridir. IFA ning bir necha o’nlab modifikatsiyalari farqlanadi. Eng keng tarqalgani qattiq fazali geterogen immuno tahlil usuli – ELISA (ensime linked immunosorbent assia) hisoblanadi. IFA ikkita maqsadda qo’llaniladi: turli xil yuqumli kasalliklar qo’zg’atuvchilarining antigenlarini aniqlash; ko’pincha turli kasalliklar qo’zg’atuvchilarini antigenlariga antitelolar (Ig A, Ig M, Ig G) ni birikishini aniqlash uchun. Shu sababli IFA bugungi kunda sog’liqni saqlash, qishloq xo’jaligi, sanoat biotexnologiyasi, tabiatni asrash va ilmiy tadqiqot ishlarida keng qo’llanilmoqda. Odam va hayvonlarning har qanday kasalliklari qo’zg’atuvchilarini, ularning alohida

quyidagicha tasavvur qilish mumkin. Birinchi reaksiya aniqlanadigan Ig (Av) va qo’zg’atuvchining tozalangan hamda immunologik planshet yuzasida qotirilgan antigeni o’rtasida amalga oshadi. Hosil bo’lgan immunkompleksni aniqlash uchun ikkinchi immunologik reaksiya o’tkaziladi. Bunda antigen sifatida bog’langan spesifik iimunoglobulinlar qatnashsa, unga qarshi antitelo sifatida peroksidaza fermenti bilan belgilangan Ig (Av) dan iborat konyugat xizmat qiladi. Keyinchalik molekulaning ferment qismi katalizlanishi natijasida fermentativ reaksiya yuz beradi. Substrat sifatida xromogen qo’shilib, reaksiya davomida rangning o’zgarishi yuzaga keladi. Rangning intensivligi namunada immunoglobulinlarning miqdoriga bog’liq bo’ladi. Reaksiya yakunlangach maxsus asboblar yordamida fotometrik o’lchashlar

ELISA (ensime linked immunosorbent assia) immunosorbent bilan bog’langan fermentni aniqlash. Polistirol planshetlarda maxsus spektral asboblar yordamida 1 daqiqa davomida 96 ta katakchada 96 ta namunada aniqlash mumkin. Umuman getorogen IFA ni qo’yish uchun 3-4 soat vaqt ketadi. IFA ning sezgirligi 1 ml moddalarni konsentratsiyalaridagi 10 - 9-10-12 mol oqsilda mikrogramm va nanogrammlarda o’lchanadi. IFA ning qo’yishdagi qiyinchiliklaridan biri tekshirilayotgan birikmalarni foni bilan (reaktiv va erituvchining ham foni bo’lishi mumkin), fermentning substrat spesifikligi va antitelolarning affinligi bilan bog’liq. Shuningdek tekshiriladigan kofaktorlar, ingibitorlar va stimulyatorlarning bo’lishi IFA ning kamchiligidir. IFA ning yana bir kamchiligi antigen determinantlar saqlovchi nativ oq

2. Turga qarshi globulinlar (giperimmun zardobdan ammoniy sulfat bilan cho’ktirib, keyin tozalab olinadi). 3. Oqsil A (tilla rang stafilokokkdan olinadi) yoki ho’kiz zardobi albumini. 4. Antigen (zararlangan hayvonlar organlaridan tayyorlanadi). Oldindan ma’lum bo’lgan musbat va manfiy antigenlar. 5. Peroksidaza fermenti (xrendan olinadi). 6. Kon’yugatlar (periodatli oksidlanish usulida antitela yoki antigen bilan bog’langan peroksidaza). 7. Substratli aralashma (5-aminosalisil kislota va vodorod peroksidi yoki ortofenilyndiamin va vodorod perikisi). 8. Detergent (sirtga faol moddalar: tvin-20, -80, triton X-300, sorbital S-20). 9. Immunologik planshet (shaffof polistiroldan tayyorlangan). 10. Shpris - dozator (peaksiya ingridientlarini quyish uchun). 11. Reaksiyani qo’yishning bevosita va

3.Antigen + antitelo kompleksini aniolash uchun suyultirmalarga turga qarshi perosidazali kon’yugatni quyish. Kon’yugat quyib chiqilgach planshetalar termostatga 37°C da 1 soat qo’yiladi. Keyin o’yiqchalarni uch marta tvinli fosfatli bufer bilan yuvib quritiladi. 4.Substratli aralashmani quyish. Reaksiya namoyon bo’lishi uchun planshet o’yiqchalariga substrat eritmasi (peroksidaza indikatori) - ortofenildiamin quyiladi. Eritmaga antigen + antitelo - kon’yugat kompleksini aniqlash uchun 3% li vodorod peroksid eritmasi qo’shiladi. Planshetlani yopib qorong’i joyda uy haroratida 15-30 daqiqa qoldiriladi. 5. Reaksiya ko’rish orqali yoki spektrofotometrik usulda hisobga olinadi. Reaksiya ko’rish orqali baholanganda kesishmalar soni bilan ifodalanadi : ++++ - intensiv bo’yalgan ; +++ - sabzi ran

Asosiy adabiyotlar 1. Вербицкий А.А., Алешкевич В.Н и др. Микробиология и иммунология. Учебное пособие Минск-2019. 2. Salimov X. va boshqalar. Epizootologiya. Darslik. Toshkent, 2016 yil . Xorijiy adabiyotlar 1. Fenner’s. Veterinary Virology (United States of America 2016 year). 2. M.Jackson Veterinary clinical pathology. America 2010 year. Qo’shimcha adabiyotlar 1. Mirziyoyev SH.M. Erkin va farovon demokratik O’zbekiston davlatini birgalikda barpo etamiz. Toshkent, “O’zbekiston” NMIU, 2017. – 29 b. 2. Mirziyoyev SH.M. Qonun ustuvorligi va inson manfaatlarini ta’minlash yurt taraqqiyoti va xalq farovonligining garovi.“O’zbekiston” NMIU, 2017.– 47 b. 3 . Bazarov X.K., Abdulakimova A.B. Veterinariya virusologiyasidan o ’ quv qo ’ llanma. Samarqand 2016 y. 4. Самуйленко А.Я., “Инфекционная па

Купить

Похожие документы
Sog‘liqni saqlash tizimi va uning xususiyatlari
Rentgenologik tekshirishning umumiy, xususiy va maxsus usullari
Jigarda gormonlarning zararsizlantirilishi
Qon ivishi, qon guruhlari va rezus omili
Sust boruvchi neyrovirusli infeksion kasalliklar